( Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization, s analyzátorem doby letu Time of Flight)
Moderní metoda, jejíž pomocí provádíme rychlou a velmi přesnou identifikaci bakterií, plísní a kvasinek izolovaných z biologického materiálu, ze zvířat, potravin a ze vzorků prostředí.
K tomuto účelu používáme hmotnostní spektrometr microflex LT MALDI TOF firmy Bruker Daltonics s iontovým zdrojem microSCOUT a analyzátorem doby letu TOF ve spojení se softwarovým systémem MALDI Biotyper.
Pro identifikaci mikroorganismu se využívá individuální kolonie mikroorganismu, vzorek je přenesen na určitou pozici nosiče – terčíku MALDI target, ošetřen speciální matricí a usušen. Není-li tato jednoduchá příprava vzorku úspěšná, lze použít k přípravě vzorku chemickou extrakci bílkovin.
Laser hmotového spektrometru MALDI-TOF ozáří nanosekundovým pulsem směs vzorku a matrice, přičemž matrice absorbuje energii pulsu a její rozklad ionizuje molekuly vzorku, především ve vysokých koncentracích přítomné ribosomální proteiny. Pozitivně nabité ionty jsou pak na krátkou vzdálenost urychleny silným elektrickým polem a vstupují do vakua v trubici detektoru, kde se pohybují rychlostí úměrnou jejich hmotnosti a náboji. Doby letu iontů se velmi přesně měří a výpočetně se konvertují na poměr molekulové hmotnosti a náboje. Získaná hmotnostní spektra jsou pro velký počet mikroorganismů druhově specifická a představují de facto jejich molekulární identifikátor, fingerprint.
Vzorek (tj. kolonie mikroorganismu) je pak druhově identifikován porovnáním jeho hmotnostního spektra s databází obsahující tisíce referenčních molekulárních identifikátorů získaných pro jednotlivé referenční kmeny mikroorganismů kombinací hmotnostních spekter z opakovaných analýz. Výstupem srovnávacího algoritmu je druhová identifikace mikroorganismu s přiřazenou hodnotou skóre vyjadřujícího shodu hmotnostního spektra vyšetřovaného vzorku s referenčním molekulárním identifikátorem v databázi MALDI Biotyper. Vlastní interpretaci výsledků provádí vždy mikrobiolog. Vyšetření se v některých případech neobejde bez dalších konfirmačních vyšetření.
Tato metoda významně doplňuje používané mikrobiologické metody používané v naší laboratoři. Pro řadu situací může být používána jako výchozí metoda poskytující velmi rychlé a velmi přesné výsledky identifikací mikroorganismů.
Hlavním přínosem pro zákazníka – chovatele a jeho veterinárního lékaře – je zrychlení a zpřesnění laboratorní diagnostiky, což v klinických situacích poskytuje možnost rychlejší a efektivnější intervence.
Jméno | Telefon | Fax | Mobil | |
MVDr. Ivana Kucharovičová | 567 143 222 567 143 224 |
602 782 835 | kucharovicova@svujihlava.cz | |
vedoucí oddělení bakteriologie vedoucí RL Antibiotické centrum pro veterinární klinickou praxi |
MVDr. Marek Brychta | 567 143 211 | 602 728 311 | brychtam@svujihlava.cz | |
odborný pracovník |
Státní veterinární ústav Jihlava Rantířovská 93/20 Horní Kosov 58601 Jihlava Česká republika Tel.: +420 567 143 111 Fax: +420 567 310 592 E-mail: info@svujihlava.cz Dat. schránka: wwkdthw |
pobočka České Budějovice Dolní 2102/2 České Budějovice 3 37004 České Budějovice Česká republika Tel.: +420 387 001 570 E-mail: info-cb@svujihlava.cz |
![]() ![]() ![]() ![]() |